產(chan) 品分類
Product Category細胞培養(yang) 技術對人類社會(hui) 的影響是不可估量的。近年來生物學的進步在很大程度上依賴於(yu) 細胞培養(yang) 技術。此外,基於(yu) 細胞培養(yang) 的實用技術在各個(ge) 領域得到了發展,包括新藥的療效和毒性評估、疫苗和生物製藥的製造以及輔助生殖技術。隨著體(ti) 細胞重編程最近在技術上變得可行,世界各地的研究人員正在激烈競爭(zheng) 再生醫學發展的地位。同樣,在這一領域,細胞培養(yang) 技術也被視為(wei) 進一步發展和普及的基礎。
在研發這些培養(yang) 基時,其主要目的是確保以低成本實現高細胞增殖率和生物量生長,並避免頻繁補充營養(yang) 物質。目前,根據添加的補充劑類型,合成培養(yang) 基可分為(wei) 幾種,例如,含血清培養(yang) 基、無血清培養(yang) 基、無蛋白培養(yang) 基和化學成分明確的培養(yang) 基。含血清的培養(yang) 基含有各種血清衍生物質,這使得培養(yang) 基成分不明確,其濃度可能因批次而異。這種情況使培養(yang) 結果的可重複性降低,並存在微生物汙染的風險。然而,含血清的培養(yang) 基可以很容易地配製出來,並有效地用於(yu) 各種細胞類型,因為(wei) 血清含有大量的活性物質,這些活性物質是動物細胞存活和生長所必需的。相比之下,無血清培養(yang) 基具有確定的成分,從(cong) 而實現結果的高可重複性,並且培養(yang) 過程可以得到驗證。此外,如果培養(yang) 條件配置為(wei) 有益於(yu) 靶細胞,則可以在混合細胞群中選擇性地生長靶細胞。在無血清培養(yang) 基中,無蛋白培養(yang) 基(不含任何蛋白質)和化學成分明確的培養(yang) 基(不含任何未定義(yi) 成分)的亞(ya) 組為(wei) 培養(yang) 係統提供了額外的穩定性和可重複性,有助於(yu) 識別細胞分泌物並降低微生物汙染的風險。然而,無血清培養(yang) 基很難設計:迄今為(wei) 止,隻有特定的細胞類型以這種方式培養(yang) 。
目前,用於(yu) 細胞培養(yang) 的常用培養(yang) 基配方已上市。因此,有些研究人員在使用培養(yang) 基時一般不會(hui) 了解其詳細信息和背景,特別是關(guan) 於(yu) 其開發的基本原理、確切成分以及這些培養(yang) 基適合的細胞類型。
每種基礎培養(yang) 基都是根據細胞類型、來源(動物種類)和培養(yang) 目的在每種情況下設計的。事實上,培養(yang) 基成分可能會(hui) 有很大差異。例如,MEM(由Eagle開發)是在有血清補充劑的假設下設計的,因此僅(jin) 包含限度的必要成分(無機鹽、糖、必需氨基酸和水溶性維生素)。相比之下,用於(yu) 無血清培養(yang) 的培養(yang) 基199和Ham's F-12含有各種其他成分。研究人員可以在實驗比較後選擇幾種培養(yang) 基。MEM、DMEM或Ham的F-12通常用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ;懸浮細胞一般選擇RPMI 1640培養(yang) 基;用於(yu) 無血清培養(yang) 的混合培養(yang) 基,如DMEM/F-12。
建立無血清培養(yang) ,使用無血清培養(yang) 係統時,有兩(liang) 點需要注意。首先,在傳(chuan) 代培養(yang) 過程中,可以在培養(yang) 容器中選擇非預期的細胞克隆,因為(wei) 無血清培養(yang) 基比含血清培養(yang) 基更能促進特定細胞克隆或細胞亞(ya) 型的增殖。其次,無血清培養(yang) 基中的雜質,無論是可避免的還是不可避免的,可能比含血清培養(yang) 基對培養(yang) 細胞的影響更大。此外,無血清培養(yang) 還有其他注意事項,即盡量減少胰蛋白酶的濃度和粘附因子。
4-(2-羥1乙1基)-1-呱1嗪乙磺酸(HEPES)具有很強的緩衝(chong) 能力,在培養(yang) 基中可能具有緩衝(chong) 作用。特別是當培養(yang) 的細胞在二氧化碳培養(yang) 箱外處理時,使用HEPES的培養(yang) 基的pH值比僅(jin) 使用碳酸氫鹽的培養(yang) 基更穩定。它也可能對高細胞密度的培養(yang) 有益,例如,當pH值由於(yu) 代謝物(如乳酸)的積累而迅速下降時。對於(yu) 缺乏血清緩衝(chong) 能力的無血清培養(yang) 基,HEPES的pH緩衝(chong) 作用可能更為(wei) 重要。然而,HEPES可能對某些類型的細胞產(chan) 生負麵影響,例如雞胚骨骺軟骨細胞和小鼠胚胎幹細胞(ES 細胞)。研究還表明,在培養(yang) 基暴露於(yu) 可見光期間,含有HEPES的培養(yang) 基會(hui) 產(chan) 生更高水平的細胞毒性產(chan) 物,主要是過氧化氫。
酚紅作為(wei) pH指示劑添加到培養(yang) 基中,有時會(hui) 影響細胞的增殖並顯示出雌激素活性。因此,測試酚紅的這些特性是否會(hui) 影響他們(men) 的細胞和經驗結果,尤其是當涉及雌激素敏感細胞(如乳腺細胞)時。
介質的汙染,不明來源的異物可能會(hui) 汙染培養(yang) 基,從(cong) 而可能影響實證結果。通常,這些汙染物包括病毒、細菌、支原體(ti) 和內(nei) 毒素。然而,還有其他類型的汙染物,如增塑劑,可能會(hui) 從(cong) 塑料器械中洗脫出來,這些物質也會(hui) 影響培養(yang) 物中的細胞。因此,研究人員可以考慮嚴(yan) 格采用無菌技術,並謹慎選擇培養(yang) 器械。在某些特殊情況下,建議在使用前立即用培養(yang) 基清洗儀(yi) 器。
培養(yang) 基凍幹粉應用在製備皮膚修複、抗皮膚衰老、修複皮膚氧化應激損傷(shang) 和修複皮膚紫外線損傷(shang) 的產(chan) 品中,產(chan) 品包括藥物、護膚品或化妝品。通過添加凍幹保護劑將含有大量幹細胞分泌物質的條件培養(yang) 基冷凍幹燥成固體(ti) 粉末,穩定細胞因子性質,使其能發揮最大的功效,特別是添加海藻糖除了能夠作為(wei) 凍幹保護劑,保護條件培養(yang) 基中細胞因子的活性,同時海藻糖本身具有抗氧化作用,延緩細胞衰老。
傳(chuan) 統用於(yu) 外周血淋巴細胞染色體(ti) 製備采用的培養(yang) 基一般為(wei) 在液體(ti) 狀態的基礎培養(yang) 基(如RPMI1640)的基礎上添加一定量血清和植物血球凝集素(PHA)而成。利用PHA對處於(yu) Gtl期的淋巴細胞的刺激作用,使之進入分裂周期,從(cong) 而能進行染色體(ti) 核型分析。但液體(ti) 狀態的淋巴細胞培養(yang) 基不利於(yu) 室溫下存放,其包含的活性物質如穀氨酰胺、PHA等易失活。即使在2-8℃低溫存放一段時間後培養(yang) 基,培養(yang) 的淋巴細胞中可進行核型分析的處於(yu) 分裂相數目顯著下降。利用凍幹技術製備培養(yang) 基凍幹粉是解決(jue) 上述問題的方法。但到目前為(wei) 止,並沒有發現太多提供具體(ti) 的培養(yang) 基凍幹工藝或方法的公開報道。
富睿捷培養(yang) 基凍幹
實驗樣本:培養(yang) 基
實驗目的:去除所有水分,凍幹成粉末
實驗設備:米兰免费网站大全下载Venues2501
實驗過程:
1.打開凍幹機預冷。
2.將樣品分裝到合適的容器內(nei) 預凍。
3.將預凍好的樣品放入透明倉(cang) 內(nei) ,啟動凍幹機。
4.凍幹結束後,釋壓取出凍幹好的樣品,儲(chu) 存或者進行後續實驗。
實驗結果:凍幹前後對比圖